Het tweede deel in de Assassin's Creed-trilogie speelt zich af in Italië ten tijde van de Renaissance, in de vijftiende eeuw. Hoofdrolspeler is Ezio Auditore di Firenze, een jongeman van goede komaf. Zijn familie is vermoord en Ezio besluit zichzelf van edelman om te scholen tot sluipmoordenaar, zodat hij zijn familie kan wreken. Dit betekent dat Ezio het opneemt tegen leden van de machtige families van Italië, die hun leven dus niet langer zeker zijn. Net als het eerste deel speelt Assassin's ...